Mémoire
| Résumé : | Au cours de l'angiogenèse, de nouveaux vaisseaux sanguins sont formés à partir de vaisseaux préexistants. Un système vasculaire défectueux peut être à l’origine de maladies telles que la rétinopathie diabétique ou de maladies inflammatoires, tandis que les tumeurs utilisent l'angiogenèse pour augmenter leur irrigation et permettre le développement de métastases. Cela fait de la régulation de l'angiogenèse un domaine d'étude prometteur. L'angiogenèse commence par le bourgeonnement (« sprouting ») d'une cellule endothéliale qui forme des protrusions cellulaires dans la direction de signaux pro-angiogéniques. Bien que les microtubules soient enrichis dans les protrusions et soient connus pour leur rôle dans la morphogenèse, leur fonction précise au cours de l'angiogenèse n'a pas encore été complètement élucidée. Pour mieux comprendre ce sujet, nous avons voulu identifier les protéines qui se localisent aux extrémités périphériques des microtubules pendant la formation des protubérances endothéliales. Nous avons utilisé une méthode de marquage de proximité, utilisant la biotine ligase TurboID. Nous avons généré des cellules endothéliales primaires exprimant la TurboID en fusion avec EB3, une protéine spécifiquement localisée aux extrémités positives des microtubules, et les avons soumises à un essai de sprouting en 3D. Nous avons effectué un pull down des protéines biotinylées et les avons identifiées par spectrométrie de masse. Nous avons pu identifier 19 protéines qui se localisent aux extrémités positives des microtubules spécifiquement pendant la formation de protrusions en 3D. L'identité de ces protéines indique une fonction intéressante des microtubules pendant l'angiogenèse de la protrusion : le crosstalk entre les microtubules et l'actine, le transport de protéines de signalisation angiogénique, le remodelage de la matrice extracellulaire et le transport vésiculaire. Tous ces processus pourraient souligner le rôle des microtubules pendant le sprouting et seront intéressants à étudier pour comprendre comment l'angiogenèse est précisément régulée. |
