• Citer

Vésicules extracellulaires dérivées de cellules stromales mésenchymateuses isolées du cordon ombilical pour le ciblage thérapeutique de cellules cancéreuses pancréatiques

par Draguet, Florian
Président du jury Corazza, Francis
Promoteur Lagneaux, Laurence
Co-Promoteur Stamatopoulos, Basile
Publication Non publié, 2023-07-10

Thèse de doctorat

• Accès en ligne
• Détails
• Contenu
• Statistiques

Résumé :

Le cancer du pancréas est l'une des formes de cancer les plus mortelles à travers le monde et le traitement de cette maladie demeure un défi majeur. Il a été rapporté que des exosomes dérivés de fibroblastes de peau de souris et chargés d’un siARN ciblant le proto-oncogène KRAS peuvent supprimer le cancer du pancréas dans des modèles de souris et augmenter significativement la survie globale. Le but de ce travail de thèse est d'évaluer la faisabilité d’utiliser les vésicules extracellulaires (VEs) dérivées de cellules stromales mésenchymateuses (CSM) humaines obtenues à partir du cordon ombilical comme transporteurs de siRNA et/ou drogues pour cibler spécifiquement les cellules cancéreuses pancréatiques. Le cordon ombilical a été choisi comme source de CSM car il présente plusieurs avantages par rapport à d'autres sources : déchet médical, grande disponibilité, collecte facile, autorenouvellement rapide, faible immunogénicité et absence de tumorigénicité. Les CSM obtenues par une méthode explant et leur expansion in vitro permet d’obtenir des VEs. Après leur purification par ultracentrifugation, leur identification et leur caractérisation biologique, les vésicules sont chargées en siRNA et/ou de drogue. Leur cinétique d’intégration et les effets biologiques in vitro de ces VEs naturelles ou chargées ont été évalués sur différentes lignées cellulaires humaines pancréatiques et intestinales présentant ou non la mutation KRASG12D. Différents paramètres ont été évalués : prolifération, apoptose, migration, invasion mais aussi l’expression de KRAS par qPCR. Les VEs chargées du siARN KRASG12D ont permis une réduction significative de la prolifération, de la viabilité et de la migration des lignées cellulaire KRASG12D par rapport aux VEs chargées en siARN scramble. Une méthode de chargement endogène de VEs a été appliquée pour obtenir des VEs chargées en DOXO. Ces VEs chargées sont rapidement intégrées par les cellules cancéreuses et ont un effet supérieur à la drogue libre. Ce projet pourrait ouvrir de nouvelles perspectives sur l'utilisation potentielle des VEs dérivées de CSM comme nano-véhicules pour le ciblage thérapeutique du cancer du pancréas.