par Berehab, Mimoune 
Président du jury Braun, Michel Y
Promoteur Bron, Dominique
Publication Non publié, 2017-10-02
Président du jury Braun, Michel Y
Promoteur Bron, Dominique
Publication Non publié, 2017-10-02
Thèse de doctorat
| Résumé : | Une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la malignité des lymphome B diffus à grande cellules (LBDGC) et dans leur résistance aux traitements devraient permettre de développer de nouvelles opportunités thérapeutiques innovantes et d’envisager dans un futur proche de nouveaux agents de thérapie ciblée. Jusqu’à ce jour, le traitement standard se solde encore par un échec chez un nombre significatif de patients. Les rechutes post traitement et les cas réfractaires restent le défi majeur pour améliorer le taux de survie global. Plusieurs méchanismes ont été décrits comme responsables de ces échecs, dont, pour une grande part, le dysfonctionnement de la machinerie apoptotique. Dès lors, des stratégies thérapeutiques activant des voies non-apoptotiques plus sélectivement dans les cellules malignes sont absolument nécessaires. La Thymoquinone (TQ), un principe actif isolé de la plante médicinale Nigell a Sativa, a démontré des propiétés anticancéreuses in vitro ainsi que dans des modèles animaux, en agissant via plusieurs mécanismes incluant principalement des effets antiprolifératifs et pro-apoptotiques. Malgré les nombreuses investigations, les mécanismes de destruction cellulaire sous-jacents à l’effet anti-cancéreux de la TQ restent ambigus et peu élucidés, notament sur les voies de mort cellulaire non-apoptotiques. L’objectif de notre travail vise l’évaluation de la sélectivité de la TQ vis-à-vis des lignées cellulaires de lymphomes B diffus à grandes cellules (LBDGC), et l’élucidation des méchanismes critiques responsables de la destruction cellulaire. Dans une première partie, nous avons démontré la capacité de la TQ à produire un effet cytotoxique plus prononcé dans des lignées cellulaires lymphomateuses (LBDGC) par rapport aux cellules normales provenant de donneurs sains. Le profil de sélectivité de la TQ s’est avéré intéressant par rapport aux agents de chimiothérapie conventionnelle dans le LBDGC. A l’échelle moléculaire, on a mis en évidence l’implication de voies de mort cellulaire non-apoptotiques, en supplément des voies apoptotiques, dans l’effet cytotoxique de la TQ dans la plupart des lignées étudiées. Nos investigations ont d’abord révélé un effet pro-apoptotique vraisemblablement sous-jacent à l’effet génotoxique de la TQ. L’importance de cette modalité de mort cellulaire dans l’effet cytotoxique de la TQ est toutefois limitée aux lignées les moins sensibles. Nos observations ont révélé la capacité de la TQ à activer la voix mitochondriale des caspases suite à la libération du cytochrome c. La mort cellulaire produite par la TQ n’est toutefois pas freinée par l’inhibition des caspases, et nos investigations ont également exclu l’implication des voies apoptotiques caspases-indépendantes. Paradoxalement, ces investigations ont montré le rôle critique des voies de mort cellulaire non-apoptotiques, en particulier dans les lignées sensibles à l’effet de la TQ. En étudiant l'origine de cette voie alternative de mort cellulaire, on a constaté que la TQ provoque le dysfonctionnement réticulaire qui se manifeste par l’activation des voies de transduction UPR et se produit de façon plus significative dans les lignées sensibles. En effet, dans cette dernière catégorie nos investigations ont démontré que la TQ produit un effet important par l’augmentation du calcium cytosolique principalement via la dépletion de celui-ci à partir des compartiments réticulaires. En accord avec ces observations, nous avons demontré que l’augmentation du calcium cytosolique joue un rôle critique, plus particulièrement dans l’effet non-apoptotique de la TQ opérant principalement dans les lignées fort sensibles aux effets de la TQ. Afin de mieux caractériser les mécanismes de susceptibilité et de résistance des lignées LBDGC, la deuxième partie de ce travail a été consacrée à l’évaluation de l'implication de l’histone déacétylase SIRT1 ( silent information regulator 1) dans la sensibilité des lignées aux effets de la TQ. SIRT1 intervient notament dans la résistance au stress oxydatif et à l’apoptose. SIRT1 serait également protectrice contre les dommages à l'ADN. Rappelons que l’expression de SIRT1 est considérée comme un facteur de mauvais pronostic pour les patients atteints de LBDGC. En focalisant nos investigations sur les lignées résistantes aux traitementx standard et moins sensibles à la TQ, nous avons démontré l'effet protecteur de SIRT1 vis-à-vis de l'effet pro-apoptotique et génotoxique de la TQ. En résumé, la capacité de la TQ à déclencher des modalités de mort cellulaire non apoptotiques pourrait constituer une stratégie prometteuse pour surmonter les mécanismes anti-apoptotiques responsables en partie de l’échec du traitement standard. Tenant compte du rôle critique de l’effet génotoxique dans le traitement des LBDGC, notre travail suggère que l'inhibition de SIRT1 pourrait être une stratégie préventive pour surmonter la résistance native ou acquise. D’autre part, nos résultats contribuent à une compréhension plus précise des mécanismes critiques responsables de l’effet cytotoxique de la TQ. Nos travaux pourraient d’autre part permettre l’étude de combinaisons innovantes de médicaments incluant la TQ in vivo. |
