Mutagénèse aléatoire du récepteur TSH pour identifier les résidus impliqués dans le processus d'activation et de dimérisation

à la classe A des GPCRs. Les récepteurs da la classe A des GPCRs sont caractérisés par la

similitude de séquence de leur domaine transmembranaire avec la rhodopsine. Outre ce

domaine dit « serpentin », qu’ils partagent avec tous les GPCRs, les rGpHs offrent la

particularité de présenter un grand domaine extracellulaire (ECD) responsable de la liaison et

de l’affinité de leurs ligands respectifs.

Les récepteurs couplés aux protéines G (GPCRs) sont les cibles de 50% des médicaments

actuellement sur le marché pharmaceutique. La compréhension de leur mode de

fonctionnement est donc essentielle au développement de nouvelles molécules capables de

cibler spécifiquement ces récepteurs. Ces dernières années, il est apparu clairement que les

GPCRs étaient présent à la surface cellulaire sous forme d’oligomères. Le but de ce travail

était d’explorer de manière approfondie, le mécanisme d’activation et de dimérisation du

rTSH en identifiant les résidus du domaine transmembranaire des récepteurs aux hormones

glycoprotéiques impliqués dans le processus d’activation et de dimérisation.

Au cours de ce travail de thèse, nous avons dans premier temps généré une banque de mutants

aléatoires du rTSH. Ces mutants ont ensuite été criblés par une approche HTRF pour mettre

en évidence des mutants dont l’activité constitutive est augmentée ou ayant perdu la capacité

de dimériser.

Nous avons ainsi déterminé de nouveaux résidus importants pour le mécanisme d’activation

du rTSH. Les résultats que nous avons obtenus permettent d’apporter des éléments de réponse

et une base de travail sur le mécanisme d’activation. Cependant une description détaillée de

l’activation reste toutefois indéterminée.