Molecular cloning of complementary DNA: preparation of a plasmid vector with low transformation background

Leriche, Anne; Christophe, Daniel; Brocas, Huguette; Vassart, Gilbert

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Molecular cloning of complementary DNA: preparation of a plasmid vector with low transformation background

par Leriche, Anne

;Christophe, Daniel

;Brocas, Huguette ;Vassart, Gilbert

Référence Analytical Biochemistry, 129, page (249-252)
Publication Publié, 1983

Article révisé par les pairs

Résumé :

A simple method that allows the rapid preparation of oligo dG-tailed plasmid vectors is presented. The procedure involves purification of the tailed molecules by hybridization to oligo dC-cellulose followed by a stepwise thermal elution. The resulting plasmid is virtually devoid of transformation activity in the absence of oligo dC-tailed DNA fragments. It allows construction of cDNA libraries with as low as 1% of colonies harboring wild-type plasmids.

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